-
支原體高靈敏度試劑盒規(guī)范的操作流程分享
發(fā)布時間： 2025-09-10 點(diǎn)擊次數(shù)： 300次在細(xì)胞培養(yǎng)、生物制藥與臨床診斷領(lǐng)域，支原體污染是威脅產(chǎn)品質(zhì)量與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的原因。支原體高靈敏度試劑盒憑借PCR或酶聯(lián)免疫等技術(shù)，可檢測低濃度的支原體DNA或抗原。其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性高度依賴于規(guī)范的操作流程。掌握支原體高靈敏度試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)使用方法，是確保警報(bào)真實(shí)可靠的關(guān)鍵。
第一步：環(huán)境準(zhǔn)備與試劑預(yù)處理在獨(dú)立的潔凈區(qū)（如生物安全柜）進(jìn)行操作，避免交叉污染。將試劑盒從-20℃冰箱取出，室溫（15-25℃）平衡15-30分鐘。檢查各組分是否齊全、無破損、無污染。嚴(yán)禁反復(fù)凍融試劑，使用后立即放回低溫保存。準(zhǔn)備好無菌離心管、移液器及濾芯吸頭。第二步：樣本采集與處理細(xì)胞培養(yǎng)液：取1-5mL上清液，4℃10,000×g離心5-10分鐘，棄沉淀，取上清用于檢測；血清/生物制品：直接取樣或按比例稀釋；組織樣本：勻漿后離心取上清。所有操作需無菌進(jìn)行，防止外源DNA/RNA污染。樣本應(yīng)新鮮或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。第三步：反應(yīng)體系配制根據(jù)說明書計(jì)算所需反應(yīng)液總量（陰性對照、陽性對照、待測樣本）。在冰上解凍引物、探針、酶混合液。使用單通道或多通道移液器，按順序加入緩沖液、酶、引物等，輕輕混勻，短暫離心去除氣泡。每批次必須包含陰性與陽性對照，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性。第四步：加樣與擴(kuò)增/孵育將配制好的反應(yīng)液分裝至PCR管或微孔板。依次加入處理后的樣本、陰性對照、陽性對照（各10-20μL），蓋緊管蓋或封板膜。放入實(shí)時熒光PCR儀或酶標(biāo)儀，設(shè)置正確的程序：PCR法：預(yù)變性→40個循環(huán)（變性-退火-延伸）→熔解曲線分析；ELISA法：37℃孵育30-60分鐘→洗板→加酶標(biāo)抗體→再孵育→顯色→終止。嚴(yán)格控制溫度與時間。第五步：結(jié)果判讀與記錄PCR法：觀察擴(kuò)增曲線是否呈“S”型，Ct值是否在有效范圍。陽性樣本Ct≤35且熔解曲線峰形正確；陰性對照無擴(kuò)增；陽性對照有擴(kuò)增。ELISA法：用酶標(biāo)儀讀取OD值，計(jì)算樣本與臨界值（CO）的比值（S/CO）。S/CO≥1.0判為陽性。記錄所有數(shù)據(jù)，保存原始圖譜或OD值表格，建立檢測檔案。
銷售熱線
主營產(chǎn)品：主要技術(shù)服務(wù)：細(xì)胞STR鑒定；支原體檢測；細(xì)胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
產(chǎn)品分類
推薦產(chǎn)品：主要技術(shù)服務(wù)：細(xì)胞STR鑒定；支原體檢測；細(xì)胞種屬檢測；端粒長度檢測；端粒酶活性檢測等。
©2025 版權(quán)所有：上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司 備案號：滬ICP備06006594號-2技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 地址：上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號 管理登陸 sitemap.xml
微信公眾號